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  • 科目:生物
  • 题型:填空题
  • 难度:较难
  • 人气:2

研究发现基因L能够通过脱落酸信号途径调控大豆的逆境响应。利用基因工程技术编辑基因L,可培育耐盐碱大豆品系。在载体上的限制酶Bsa I切点处插入大豆基因L的向导DNA序列,将载体导入大豆细胞后,其转录产物可引导核酸酶特异性结合基因组上的目标序列并发挥作用。载体信息、目标基因L部分序列及相关结果等如图所示。

1)用PCR技术从大豆基因组DNA中扩增目标基因L时,所用的引物越短,引物特异性越______(填“高”或“低”)。限制酶在切开DNA双链时,形成的单链突出末端为黏性末端,若用Bsa I酶切大豆基因组DNA,理论上可产生的黏性末端最多有______种。载体信息如图甲所示,经BsaI酶切后,载体上保留的黏性末端序列应为5'-______-3'5'-______-3'

2)重组载体通过农杆菌导入大豆细胞,使用抗生素______筛选到具有该抗生素抗性的植株①∶④。为了鉴定基因编辑是否成功,以上述抗性植株的DNA为模板,通过PCR扩增目标基因L,部分序列信息及可选用的酶切位点如图乙所示,PCR产物完全酶切后的电泳结果如图丙所示。据图可判断选用的限制酶是______,其中纯合的突变植株是______(填序号)。

3)实验中获得1株基因L成功突变的纯合植株,该植株具有抗生素抗性,检测发现其体细胞中只有1条染色体有T-DNA插入。用抗生素筛选这个植株的自交子代,其中突变位点纯合且对抗生素敏感的植株所占比例为______,筛选出的敏感植株可用于后续的品种选育。

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研究发现基因L能够通过脱落酸信号途径调控大豆的逆境响应。利用